High-yield expression of recombinant soybean agglutinin in plants using transient and stable systems.

Tremblay, R., Feng, M., Menassa, R., Hüner, N.P.A., Jevnikar, A.M., et Ma, S. (2011). « High-yield expression of recombinant soybean agglutinin in plants using transient and stable systems. », Transgenic Research, 20(2), p. 345-356. doi : 10.1007/s11248-010-9419-0  Accès au texte intégral (en anglais seulement)

Résumé

L’agglutinine du soja (AS) est une lectine végétale qui se lie spécifiquement à la N acétylgalactosamine et qui peut agglutiner une grande variété de cellules. L’AS recèle un fort potentiel d’applications en médecine et en biotechnologie, notamment le dépistage et le traitement du cancer du sein, l’isolement des cellules fœtales du sang maternel en vue du dépistage génétique, la possibilité de l’utiliser comme système de transport pour la libération des médicaments oraux et l’utilisation comme étiquette d’affinité pour la purification de haute qualité des protéines étiquetées. Le succès de ces applications dépend, dans une large mesure, de la mise au point d’un système d’expression d’une très grande efficacité pour une source d’AS recombinante (ASr). Nous démontrons ici l’utilité des systèmes d’expression transitoires et stables dans Nicotiana benthamiana et la pomme de terre, respectivement, pour la production d’ASr, avec la protéine transgénique accumulée à raison de 4 % des protéines solubles totales dans les feuilles de Nicotiana benthamiana et de 0,3 % dans les tubercules de pomme de terre. De plus, nous montrons que les deux ASr issues de plantes conservent leur capacité à provoquer l’agglutination des globules rouges, sont glycosylées de façon similaire par comparaison à l’AS native, conservent leur capacité de liaison spécifique à la N acétylgalactosamine et sont très résistantes à la dégradation dans les liquides gastrique et intestinal simulés. La purification sur colonne d’affinité au moyen de la N acétylgalactosamine comme ligand spécifique a donné lieu à un taux de récupération et à un degré de pureté de l’ASr élevés. Ces travaux constituent la première étape vers l’utilisation de l’ASr dans diverses nouvelles applications, dont la mise au point de l’ASr comme une nouvelle étiquette d’affinité pour la purification simplifiée des protéines étiquetées et comme une nouvelle molécule de transport pour la libération des médicaments oraux.

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